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CRISPR Reagent

介紹
CRISPR/Cas9系統又稱為RGEN(RNA-Guided Endonuclease)，是存在於大多數細菌中的一種後天免疫防禦機制。全名為常間迴文重複序列叢集(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)。CRISPR目前被廣泛應用於遺傳工程上作為基因編輯工具。RGEN可在DNA上進行編輯修飾，例如knock-out、knock-in、conditional knock-in(loxp)、gene correction、overexpression、modification、tagging。

我們的優勢
1 .CRISPR/Cas9材料供應商(Toolgen)本身即為世界最早發表CRISPR/Cas9的研究團隊之一，技術領先全球、文獻最多。
2 .雙質體系統，客戶可以自行調整轉染sgRNA和Cas9質粒的比例以達到基因編輯最佳效率。
3 .經驗豐富的sgRNA設計，活性高、脫靶率(off target)極低。
4 .在細胞系統中擁有獨一無二的篩選系統(surrogate reporter)，大大的提升篩選到基因編輯細胞的效率。
5 .免費指導客戶建立基因編輯技術。
6 .基因編輯成功案例最多，經驗最豐富。
7 .另有全球唯一提供Cas9 recombinant protein，提升基因編輯動物的成功機率。

材料
1 .DNA-directed RGENs(dRGEN)
有別於sgRNA和Cas9在同一質體，我們使用分開sgRNA及Cas9質體的系統。客戶可自行調整轉染sgRNA及Cas9質體的比例以達到基因編輯最佳化效率。
2 .Active RGENs(aRGENs)
獨家Cas9 Recombinant Protein可直接利用顯微注射(Microinjection)打入胚胎產出動物(knock-out or knock-in)，或是利用電轉染 (Electroporation)的方式轉染進stem cell，iPS cell和 primary cell，省去plasmid轉出蛋白的過程，利用更短的時間達到基因編輯目的。
3 .Surrogate reporter篩選系統
Surrogate reporter具有與目標切位相同的序列，當sgRNA與Cas9作用在目標序列後，產生frameshift，進而使後面的reporter gene表現，可以間接反映出sgRNA與Cas9的作用並有效篩選出被基因修飾的陽性細胞。

產品規格

產品名稱	內容物	交期
細胞用Custom CRISPR plasmid set	1.sgRNA expression plasmid x1 2.Cas9 protein expression plasmid x1	3 weeks
DIY CRISPR Clonig Kit	1.sgRNA cloning vector (10 rxns.) 2.Cas9 protein expression plasmid	3 weeks
螢光型細胞篩選質粒	Fluorescence surrogate reporter plasmid (5ug)x 1	3 weeks
細胞表面蛋白型細胞篩選質粒	Cell surface protein surrogate reporter plasmid (5ug)x 1	3 weeks
抗藥型細胞篩選質粒	Hygromycin surrogate reporter plasmid (5ug)x 1	3 weeks
動物用CRISPR /Cas9 set	1. sgRNA mRNA x 1(>1.5ug) 2. Cas9 protein x 1 (50ug)	4 weeks
Cas9 Recombinant Protein	Cas9 protein x 1 (50ug)	3 weeks
eSpCas9(1.1) Recombinant Protein	Cas9 protein x 1 (50ul, 1ug/ul)	2 weeks
TOOLS Cas9 Recombinant Protein	Cas9 protein x 1 (50ul, 1ug/ul)	2 weeks

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